Авторы: Xu, Siqi; Zhang, Qinying; Xie, Xueer; Zhou, Mengruo; Chen, Yunxia; Liu, Yutong; Luo, Chenying; Zhang, Qi; Zheng, Han; Feng, Saixiang; Liao, Ming.
Публикация: Journal of Virology, e0056326, 11 июня 2026 г.
Аннотация:
Случаи инфицирования людей вирусами гриппа птиц (AIV) подтипа H7 зарегистрированы во всём мире и связаны с различными подтипами вируса и географическими регионами. Однако возможности эффективной терапии, направленной против вирусов гриппа H7, остаются ограниченными. В данном исследовании с помощью дрожжевой двухгибридной системы (Y2H) была идентифицирована панель нанотел, направленных против домена HA1 гемагглютинина (HA). Впоследствии было подтверждено, что шесть кандидатов обладают активностью в реакции ингибирования гемагглютинации (HI). Часть из них также продемонстрировала вируснейтрализующую активность в тесте микронейтрализации (MN), при этом все нанотела обладали способностью связываться с антигеном в ELISA. Среди исследованных кандидатов нанотело Nb74 проявило ингибирующую активность против четырёх китайских рекомбинантных штаммов Rv1–Rv4, соответствующих вакцинным штаммам и созданных на основе последовательностей HA инактивированных вакцинных штаммов H7-Re1–H7-Re4. Значения HI-IC₅₀ для Rv1–Rv4 составляли соответственно 0,23; 0,57; 3,65 и 43,75 мкг/мл, а значения MN-IC₅₀ для Rv1–Rv3 — 0,02; 0,06 и 1,09 мкг/мл. Nb74 также сохраняло активность против различных клинических изолятов, хотя выраженность HI-активности различалась в зависимости от штамма. В экспериментах с контрольным заражением мышей интратрахеальное введение Nb74 обеспечивало выраженную защиту. Выживаемость составляла 100% при заражении Rv1 и 80% при заражении Rv2 при профилактическом введении в дозе 2 мг/кг или терапевтическом введении в дозе 4 мг/кг. У животных, получавших Nb74, наблюдались более быстрое восстановление массы тела, снижение вирусной нагрузки в лёгких и уменьшение выраженности патологических изменений лёгочной ткани. Исследование механизма действия показало, что Nb74 нейтрализует вирус путём блокирования его прикрепления к клеткам хозяина. Кроме того, сочетание масс-спектрометрии водородно-дейтериевого обмена (HDX-MS) с анализом мутантов ускользания позволило локализовать эпитоп Nb74 в консервативном латеральном участке субъединицы HA1, соответствующем конформационному эпитопу. В целом результаты демонстрируют терапевтический потенциал Nb74 при интратрахеальном введении и предоставляют новые данные, которые могут быть использованы при разработке вакцин против вирусов гриппа птиц H7.
Значимость исследования:
Вирусы гриппа птиц H7, включая как низкопатогенные, так и высокопатогенные штаммы, представляют постоянную угрозу для птицеводства и общественного здравоохранения, тогда как непрерывная антигенная эволюция субъединицы HA1 снижает эффективность вакцин. Для обеспечения готовности к потенциальным пандемическим угрозам необходимы широко нейтрализующие препараты против H7 AIV, однако терапевтические средства на основе нанотел до настоящего времени остаются недостаточно изученными. В данном исследовании было идентифицировано нанотело Nb74, способное ингибировать гемагглютинацию и нейтрализовать несколько штаммов H7. Важно, что интратрахеальное введение Nb74 обеспечивало защитный эффект, подтверждая потенциальную возможность респираторного применения терапевтических препаратов на основе нанотел. Анализ механизма действия показал, что Nb74 блокирует прикрепление вируса благодаря распознаванию консервативного конформационного эпитопа, расположенного на латеральном участке субъединицы HA1. Полученные данные выявляют консервативный и функционально уязвимый участок гемагглютинина H7 и создают основу для разработки противовирусных препаратов на основе нанотел, а также усовершенствованных вакцинных стратегий против новых угроз, связанных с вирусами гриппа птиц H7.
Язык: английский.
Начало формы
Конец формы
DOI:
http://dx.doi.org/10.1128/jvi.00563-26